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Departamento de Biologia / IB/USP |
Figura 3. Análise do loco FMR1 por
Southern blotting, usando-se a sonda StB12.3, após
digestão do DNA com as enzimas de restrição
EcoRI e EagI. Quando a ilha CpG está
desmetilada ambas as enzimas conseguem cortar o DNA, mas quando
ela está metilada a EagI não reconhece o
sítio de corte. (a) Num homem normal, o fragmento normal
desmetilado que contém o gene FMR1 e resulta do corte pelas
duas enzimas tem 2,8 kb. (b) Quando a pré-mutação
está presente, o fragmento desmetilado é maior,
podendo chegar a 3,4 kb, dependendo do tamanho da repetição
de trinucleotídeos. (c) Já no afetado, o número
de repetições é muito maior e a enzima EagI
não corta a ilha CpG que está metilada; como
conseqüência são produzidos fragmentos bem maiores,
com mais de 5,8 kb.
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